化學(xué)發(fā)光成像儀是一種用于檢測和分析化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的儀器,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。化學(xué)發(fā)光指的是在化學(xué)反應(yīng)過程中產(chǎn)生的光輻射現(xiàn)象,當(dāng)某些物質(zhì)發(fā)生氧化還原反應(yīng)時,會釋放出能量,并以光的形式發(fā)射出來。化學(xué)發(fā)光成像儀可以捕捉這種光信號,并將其轉(zhuǎn)換為圖像或數(shù)據(jù),以便于分析。
主要部件
光學(xué)系統(tǒng):包括光源、濾光片、透鏡等。光源用于提供激發(fā)光,濾光片可選擇特定波長的光線,排除其他干擾光線,透鏡則用于聚焦和成像,確保圖像的清晰度和準(zhǔn)確性。
探測器:常用的探測器有制冷CCD傳感器和EMCCD傳感器。制冷CCD傳感器通過降低溫度減少暗電流噪聲,提高信號的穩(wěn)定性和靈敏度;EMCCD傳感器則具有更高的靈敏度和量子效率,能夠檢測到更微弱的光信號。
信號處理系統(tǒng):對探測器采集到的電信號或數(shù)字信號進(jìn)行放大、濾波、模數(shù)轉(zhuǎn)換等處理,將其轉(zhuǎn)化為計(jì)算機(jī)能夠識別和處理的圖像數(shù)據(jù)。
數(shù)據(jù)處理與分析軟件:具有圖像采集、顯示、存儲、分析等功能。可以對圖像進(jìn)行亮度、對比度、色彩等調(diào)整,還能進(jìn)行條帶定量、分子量計(jì)算、相對表達(dá)量分析等操作,方便科研人員對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和解讀。
性能指標(biāo)
靈敏度:指儀器能夠檢測到的最小化學(xué)發(fā)光信號強(qiáng)度,通常用可檢測的最小蛋白或核酸量來表示,如fg級或pg級的蛋白或核酸樣品。
分辨率:決定了儀器能夠分辨的最小細(xì)節(jié),通常用像素?cái)?shù)量或像素尺寸來衡量,如幾百萬像素甚至更高分辨率,像素尺寸越小,分辨率越高。
信噪比:信號與噪聲的比值,反映了儀器檢測信號的可靠性。高信噪比意味著儀器能夠在噪聲背景下更清晰地檢測到目標(biāo)信號,一般要求信噪比≥56db。
動態(tài)范圍:儀器能夠準(zhǔn)確檢測和測量的信號強(qiáng)度范圍,寬動態(tài)范圍可以同時檢測到強(qiáng)信號和弱信號,如0-4.8od的動態(tài)范圍。
應(yīng)用領(lǐng)域
生命科學(xué)研究:在蛋白質(zhì)研究中,用于Western Blot化學(xué)發(fā)光成像,檢測蛋白質(zhì)的表達(dá)水平、分子量大小等;在核酸研究中,可進(jìn)行核酸電泳檢測、定量PCR產(chǎn)物驗(yàn)證、基因芯片檢測等。
醫(yī)學(xué)診斷:用于臨床疾病的診斷和監(jiān)測,如檢測血液或尿液中的特定蛋白質(zhì)、核酸等生物標(biāo)志物,輔助診斷腫瘤、感染性疾病、遺傳性疾病等。
藥物研發(fā):在藥物篩選和藥物作用機(jī)制研究中,通過檢測細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì)表達(dá)、基因表達(dá)等變化,評估藥物的療效和安全性。
食品安全檢測:可用于檢測食品中的有害物質(zhì),如農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、微生物污染等,保障食品安全。